En el centro de esta imagen se representa una figura femenina, se trata de Santa Ana que hace contrapunto con la imagen de San Joaquín que se encuentra en el extremo opuesto. La imagen, bien construida está sobre fondo neutro en el que se ha iluminado la esquina superior izquierda. La santa hace un juego con las manos, la de la derecha la eleva a la altura del pecho, mostrando la palma y la de la izquierda la coloca en a la altura de su cadera exhibiendo la palma también.
Las figuras de Santa Ana y San Joaquín, están en el retablo por su cercanía a la vida de Virgen y completan un programa mariano.
Santa Ana ha sido representada en numerosos pasajes, junto con San Joaquín, unidos por una rama de vid y custodiados por las Purísima Concepción al centro, en el Nacimiento de la Virgen, en la presentación de la Virgen en el templo, en los cinco señores y como en este caso en la Anunciación.
La información sobre Santa Ana procede de los Evangelios Apócrifos. Se consigna que fue hija de Isaac, perteneciente a la estirpe de David y esposa de Joaquín, y que siendo una mujer casi anciana concibió por la gracia de Dios, dando vida a la Virgen María. En ocasiones se la representa con una rama de laurel que alude a la concepción de María.
Según Pacheco, Santa Ana tenía 67 años y San Joaquín 68 al tiempo en que concibieron a María.
